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環(huán)氧合酶2(COX-2)ELISA試劑盒(大鼠 小鼠 人等)

更新時間:2017-09-01      瀏覽次數(shù):1170

環(huán)氧合酶2(COX-2)ELISA試劑盒(大鼠 小鼠 人等)

檢測樣本:血清、血漿、細胞上清液、組織勻漿及相關(guān)生物液體等

 

名稱96孔48孔備注
微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×12條2-8℃
標(biāo)準品6支6支-20℃(用不完)
樣本稀釋液6mL3mL按說明書進行稀釋
檢測抗體-HRP10mL5mL2-8℃
底物A6mL3mL2-8℃
底物B6mL3mL2-8℃
終止液6mL3mL2-8℃
20×濃洗滌緩沖液25ml15ml
說明書1份1份
自封袋1個1個
封板膜2張2張

 

需自備的設(shè)備及試劑:                               

1.450±10nm濾光片酶標(biāo)儀(建議儀器使用前預(yù)熱)

2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.

3.Eppendorf 移液器.

4.蒸餾水或去離子水.

5.脫脂棉吸水紙.

6.37℃恒溫箱.

7.100ml和1000ml量筒.

8.準備若干個標(biāo)準品稀釋管.

 

試劑盒的儲存及有效期:                              

未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。

使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。

 

 

實驗原理:                                     

將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。

 

精密度:                                       

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%)=SD/mean×100

批內(nèi)差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%

 

穩(wěn)定性:                                       

經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。

為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

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